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Leica有多種型號(hào)的石蠟切片機(jī)。常規(guī)石蠟切片有手動(dòng)、半自動(dòng)和電動(dòng)之分。價(jià)格也成梯度。
目前，國(guó)內(nèi)外大多數(shù)的科研工作者都以切片機(jī)預(yù)設(shè)的切片厚度值作為組織切片真實(shí)厚度的默認(rèn)值，很少有人探究組織切片厚度的變化可能會(huì)對(duì)觀察和評(píng)測(cè)結(jié)果造成多大影響。
實(shí)際中，同一組織樣本不同厚度的切片在顯微鏡下觀察時(shí)，薄組織切片的顏色往往淡于厚切片，如果以鏡下觀察的顏色深淺來(lái)定性判斷被檢測(cè)化學(xué)物質(zhì) （包括抗原或抗體）的有無(wú)，則可能因?yàn)榻M織切片較薄而被認(rèn)為是陰性的結(jié)果。
同時(shí)，組織切片較薄、顏色太淺不但對(duì)組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)的定位觀察產(chǎn)生影響，而且更會(huì)因?yàn)榍衅穸鹊牟缓愣ǎ蓸O大地動(dòng)搖定量分析結(jié)果的可靠性。
即使在恒定切片機(jī)厚度刻度值的條件下手動(dòng)切片，同一組織切片內(nèi)及相鄰的組織切片之間也常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的表現(xiàn)為顏色深淺不一的厚度差異。
切片厚度受制片過(guò)程中多種因素的影響，例如：切片刀的鋒利程度、切片時(shí)的環(huán)境溫度、切片的速度、石蠟的熔點(diǎn)和硬度及韌性等。
下面就手動(dòng)和自動(dòng)兩種切片的厚度差異在這里做個(gè)介紹，這種差異的結(jié)果是經(jīng)采用二次包埋法進(jìn)行重切片，用圖像分析儀測(cè)量組織切片的實(shí)測(cè)厚度，觀察組織切片實(shí)測(cè)厚度的變化而得出的，其可為組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)的定性與定位觀察及定量分析結(jié)果的評(píng)價(jià)提供參考。
分析結(jié)果顯示：手動(dòng)和自動(dòng)切片對(duì)組織切片的實(shí)測(cè)厚度有顯著性差異 （p<0.05）組織種類對(duì)組織切片的實(shí)測(cè)厚度無(wú)顯著性差異 （p>0.05）。
各組織切片的厚度測(cè)量均值均較切片機(jī)預(yù)設(shè)厚度值大，同一切片機(jī)預(yù)設(shè)厚度值條件下，自動(dòng)切片的實(shí)測(cè)厚度均值均小于手動(dòng)切片，且更接近切片機(jī)預(yù)設(shè)刻度值。
相同組織的組織切片實(shí)測(cè)厚度的極端離散趨勢(shì) （極差）隨切片機(jī)預(yù)設(shè)厚度值的增加而呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，且手動(dòng)切片組的極差大于自動(dòng)切片組，但兩組之間的極差比較尚沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
盡管石蠟包埋組織切片的制備方法已得到不斷的改良定型，但是，切片機(jī)預(yù)設(shè)的切片厚度值與組織切片的實(shí)測(cè)厚度值間的差異情況仍不能為人們所忽視，它對(duì)評(píng)判組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)和化學(xué)物質(zhì) （包括抗原或抗體）有無(wú)和多少將產(chǎn)生影響，應(yīng)引起高度的重視。
切片機(jī)預(yù)設(shè)的切片厚度刻度值與組織切片的實(shí)測(cè)厚度值之間有10%以上的差異，切片機(jī)標(biāo)示厚度與實(shí)測(cè)厚度間的平均誤差為17.2%。
實(shí)驗(yàn)獲得的組織切片厚度變化的研究結(jié)果表明切片機(jī)的切片厚度預(yù)設(shè)值低估了石蠟包埋組織切片的真實(shí)厚度，實(shí)驗(yàn)切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度與手動(dòng)和自動(dòng)切片厚度相差較大。
其主要原因是由于切片機(jī)作自動(dòng)切片時(shí)其切片的速度恒定，石蠟包埋的組織受力均勻，而手動(dòng)切片時(shí)的切片速度難以恒定，致使石蠟包埋的組織受力不均勻，切片機(jī)的使用年限越久，活動(dòng)機(jī)械連接的間隙越大，產(chǎn)生實(shí)際切片的厚度大于或小于切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度的機(jī)會(huì)越大。
如使用的切片機(jī)為全新的，則實(shí)測(cè)切片厚度均大于而不小于切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度，而使用年久的手動(dòng)切片機(jī)，其實(shí)測(cè)切片的厚度有不少小于切片機(jī)預(yù)設(shè)切片厚度，這與上述分析相吻合的。
實(shí)際操作表明全自動(dòng)切片機(jī)的切片速度快慢的設(shè)置與切片機(jī)輪轉(zhuǎn)速度有關(guān)，但對(duì)石蠟包埋組織蠟塊切片瞬間的速度并未產(chǎn)生明顯影響。
手動(dòng)切片的速度是以操作者個(gè)人主觀感覺(jué)來(lái)控制的，難以保證恒定的切片速度，其組織切片間厚度的差異更大，這與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的極差是相符的。
通過(guò)觀察組織切片厚度的變化，發(fā)現(xiàn)不同切片方法對(duì)組織切片真實(shí)厚度有影響，自動(dòng)切片的組織薄片的實(shí)測(cè)厚度與預(yù)設(shè)厚度刻度值的差異小于手動(dòng)切片，自動(dòng)切片獲得的組織切片的精度更高，優(yōu)于手動(dòng)切片。
因此，石蠟切片機(jī)的手動(dòng)、半自動(dòng)和自動(dòng)切片機(jī)究竟該怎么選呢？
只要條件允許，盡量選擇一款優(yōu)質(zhì)的全電動(dòng)切片機(jī)！
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